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為什么非要先克隆到中間載體上測序，而不是直接到

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為什么非要先克隆到中間載體上測序，而不是直接到

2023-03-23 08:55

1個回答
2023-03-23 10:18
為什么非要先克隆到中間載體上測序
可以不同克隆到載體上。
dna測序過程，其實是pcr的過程，你只要有足夠的模板用于pcr反應(yīng)就行，不一定要克隆到載體上。
當然，大多數(shù)都是克隆到載體上，因為你需要將待測dna遞交給測序公司，位于載體上的dna可以保存在細菌中，方便運輸，也方便測序公司進行擴增（培養(yǎng)菌，提質(zhì)粒就行了），有時測序是需要重測的，一次不能測完，培養(yǎng)細菌擴增質(zhì)粒是最簡單的方法。
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DNA測序為什么要克隆到載體上去 而不直接測呢
1個回答2022-06-21 13:00
一個是純化和擴大培養(yǎng)，一個就是為了獲得想要的dna片段，弄清序列
克隆測序和PCR產(chǎn)物直接測序有哪些不一樣
1個回答2022-10-01 19:32
眾所周知PCR壙增程現(xiàn)錯配現(xiàn)象能所錯配都發(fā)同位置PCR片段直接測序其結(jié)PCR片段眾混合物結(jié)某點現(xiàn)幾十錯配現(xiàn)象數(shù) （或許幾十萬）點應(yīng)該確測序錯配現(xiàn)象反映 PCR片段直接測序結(jié)反映PCR用模板原始結(jié)PCR...
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請問PCR產(chǎn)物直接測序和克隆后再測序有什么區(qū)別，用PCR產(chǎn)物直接測序不是更省時間嗎，省得再連到載體上了啊
3個回答2023-05-14 21:59
PCR產(chǎn)物直接測序，引物端約有幾十個堿基是測不出來的，如果你恰好關(guān)注這個位置，那么或者從另一端測通（你的產(chǎn)物不長），或者克隆測序 此外，很多時候由于PCR產(chǎn)物不專一，直接測序效果不好，而克隆測序沒這個...
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為什么基因測序前將基因PCR克隆后還要放到大腸桿菌載體上再測序？
4個回答2022-07-12 09:06
補充一個更重要和實際的考慮：實際測序中，可靠的測序結(jié)果往往是從引物后二三十個堿基才開始的。如果片段比較長，超過一次測序能力如七八百之外，即使雙向測序也無法獲得引物（排除非特異擴增）或緊鄰引物處的序列時...
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克隆基因為什么一直連不到載體上
2個回答2023-05-28 12:02
基因克隆上去沒有原因，克隆不上去就不好說清楚了。 對于這種情況，直接交給專業(yè)的公司做就行了，也就千把塊錢，時間也就是1-2周。我們實驗室是在禾船生物克隆的，非常便捷。
載體構(gòu)建中，引物設(shè)計序列與克隆測序不一致，向您請教！
2個回答2022-11-29 08:15
第一個問題，只有一個堿基缺失，克隆測序和引物合成都沒有問題； 第二個問題：酶切連接入載體后，克隆過程就完成了； 第三個問題：如果你說的是轉(zhuǎn)化過程的話，應(yīng)該是先做好連接，再做轉(zhuǎn)化。
基因克隆載體連接步驟
1個回答2023-01-18 05:40
基因克隆的步驟： 1、獲取目的基因； 2、將目的基因與載體連接； 3、重組體載入受體細胞； 4、重組體的篩選、克隆。 具體到載體連接這一步，將酶切后的載體與目的片段加入相應(yīng)的連接體系中就可以了。
連接T載和不連T載測序結(jié)果不一樣怎么辦
1個回答2022-06-23 13:06
測序結(jié)果不一致，這個直接咨詢給你測序的公司就行了。如果測序結(jié)果可信度高，這個相似性就太低了。 測序完成后是否有終止密碼子就要看你測序的這一段是否包含了終止密碼子了，這個需要你自己分析。
為什么要先構(gòu)建克隆載體再用表達載體
2個回答2023-02-22 22:55
你最早的目的基因、質(zhì)粒什么的都是拿去公司合成的，很少量，所以要先克隆，把它變多，再做實驗，去表達
為什么對PCR產(chǎn)物直接測序沒有測序信號
1個回答2023-02-23 14:40
原因在于測序時經(jīng)歷了PCR反應(yīng)及測序反應(yīng)（測序反應(yīng)本身也是PCR反應(yīng)）二次聚合酶的打滑現(xiàn)象.原因不明的復(fù)雜結(jié)構(gòu),測序結(jié)果就出現(xiàn)突然信號減弱或消失.出現(xiàn)這些現(xiàn)象的原因由DNA模板本身立體結(jié)構(gòu)所造成的. ...
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